[]



страница13/54
Дата22.06.2019
Размер2.65 Mb.
1   ...   9   10   11   12   13   14   15   16   ...   54

Studies in Animals

ABM Extracts as Anticancer Agents


Aqueous extracts of ABM given in the drinking water to rats and mice before chemical cancer induction exhibited antimutagenic effects, but were ineffective when administered in the post-induction period demonstrating protection only in the initiation step of liver carcinogenesis (37,68,69). These studies are of particular interest because the extraction consisted in preparing a ‘crude aqueous extract’ leaving a powdered dry fruiting body in water at room temperature for 2 h, which is the way ABM is popularly prepared (69).

Interestingly, rats fed with a dry powdered form of ABM using two strains (99/26 and 99/29) and prepared from two different moments of harvest (opened or closed basidiocarp) at 10% of the diet, on the basis of the strain and harvest (the more effective was strain Ab 26 closed basidiocarp) exhibited different significant antimutagenic activity, more evident when considering the reduction of both size and number of the preneoplastic lesions, even when given in the post-initiation period (70). Moreover, not only polysaccharides but also the lipid fraction of ABM was found to contain a compound with antitumor activity, subsequently identified as ergosterol (a precursor of ergocalciferol), that inhibited tumor-induced neovascularization in sarcoma 180-bearing mice by oral administration for 20 days without side effects, though the extract had no cytotoxic effect in vitro (71). Kimura (72) has identified from the lipid fraction sodium pyroglutamate, which has shown not only to have antiangiogenic (inhibition of von Willebrand Factor expression in tumors) and antitumor activity in Lewis lung carcinoma-bearing mice but also an inhibitory effect on the cancer-induced reduction of immune functions.

Ethanol fractions obtained from hot-water extract of mycelium or dried fruiting induced TNF-α and IL-8 secretion in rat bone-marrow macrophages. Further fractionation with increasing ethanol concentrations resulted in the reduction of this cytokine-inducing ability in mycelial extracts, but enhanced it in fruiting body extracts. Whereas mycelial fractions did not induce nitric oxide production, fractions obtained by precipitation of fruiting-body extract with high ethanol concentrations stimulated macrophages to produce significantly higher levels of nitric oxide than controls (23).

In a mouse model of peritonitis induced by i.p. injection of fecal stem solutions the pre-challenge oral administration of an aqueous ABM extract protected mice against lethal septicemia after fecal peritonitis as demonstrated by a reduction in bacteremia and increase in survival rate, which was comparable with the survival of a verum group to which were administered per os metronidazole and doxycicline (73); and confirming previous results of the same group in mice given i.p. infection with the virulent Streptococcus pneumoniae serotype 6B (74).



Исследования на животных
ПРО Экстракты как противораковые агенты
Водные экстракты ПРО , приведенные в питьевой воде в крыс и мышей до индукции химической рака выставлены антимутагенными эффекты, но оказались неэффективными при введении в пост- индукционного периода , демонстрируя защиту только в инициации шагом канцерогенеза печени ( 37,68,69 ) . Эти исследования представляют особый интерес , поскольку извлечение состоит в подготовке ' сырой водный экстракт ' оставлением порошкообразного сухого плодового тела в воде при комнатной температуре в течение 2 ч, чтоспособ ПРО широко подготовлен (69).
Интересно, крыс, которых кормили сухой порошкообразной форме ПРО с использованием двух штаммов ( 99/26 и 99/29 ) и получали из двух различных моментах урожая ( открыта или закрыта basidiocarp ) в 10% от рациона, на основе штамма и урожай ( тем более эффективным было штамма АВ 26 закрытая basidiocarp ) выставлены различные значительное антимутагенную активность , более очевидной при рассмотрении снижение и по размеру и численности предраковых поражений , даже когда дано в пост- инициации периода (70). Более того, не только полисахариды , но и липидной фракции ПРО было установлено, содержат соединение с противоопухолевой активностью , впоследствии идентифицирован как эргостерола ( предшественник эргокальциферол ) , которые ингибируют индуцированного опухолью новых сосудов в саркомы 180 , несущих мышей при пероральном введении в течение 20 дней без побочных эффектов , хотя экстракт не имели цитотоксический эффект в пробирке (71) . Кимура (72) определила из липидов пироглутамата доля натрия, который показал не только для того, антиангиогенной ( ингибирование экспрессии фактора Виллебранда в опухолях ) и противоопухолевой активностью в карцинома легких Льюис мышей, несущих но итормозящее действие на железы - индуцированной снижение иммунных функций .
Этанол фракции, полученные от горячего водного экстракта мицелия или сушеных плодах индуцированной TNF- α и IL-8 секрецию в крыс макрофагов костного мозга . Кроме того фракционирование при повышении концентрации этанола привело к снижению этого цитокина вызывающие способности в мицелиальных экстрактов , но повышается его в экстрактах плодового тела . В то время как мицелия фракции не вызывает производство оксида азота , фракции, полученные путем осаждения экстракта плодоношения тела с высокой концентрацией этанола стимулируется макрофаги производить значительно более высокие уровни оксида азота , чем в контрольной (23) .
В мышиной модели перитонита , вызванных i.p. впрыска фекальных решений стволовыхпредварительно вызов пероральное введение водного экстракта ПРО защищенной мышей от летальной септицемии после фекальных перитонита о чем свидетельствует снижение бактериемии и увеличение выживаемости , который был сравним с выживания VERUM группы, к которой были вводить перорально метронидазол и doxycicline (73) , и подтверждением результатов предыдущих работ той же группы в мышей, учитывая ф инфекция с вирулентным пневмококк серотипа 6В (74).

ABM Extracts as Immunostimulants


In an interesting article (75), experimenting intradermal injections of four different ABM extracts (ethanol, water, oxalate soluble and insoluble fractions) in a bilateral Meth-A tumor model, mice administered with the oxalate soluble fraction were tumor free after 21 days. In the same article, oral ad lib administration of the same fraction had no antitumor effect but enhanced that of the intratumorally injected fraction (P < 0.01 versus injection alone) (75). Significant macrophage chemotactic factor, but not neutrophil chemotactic factor activity, was detected, while serum levels of immunosuppressive chemotactic factor (a marker protein of activated macrophages and neutrophils in response to biological response modifier) increased dramatically suggesting an immunopotentiating activity besides a direct cytotoxic action on tumor cells (75).

The oxalate soluble fraction consisted of a large amount of carbohydrates (exclusively glucose as determined by HPLC) and small amounts of proteins; carbohydrates containing (1-4)-β-d-glucan and (1-6)-β-d-glucan in the ratio of approximately 1 : 2 (45,75).

Treatment with hot-water extracts of ABM fruiting bodies increased NK activity of spleen cells in naive BALB/c mice (75). In Meth A-bearing BALB/c mice, the same extracts enhanced the induction of antigen-specific cytotoxic T-lymphocytes and IFN-γ production. Up-regulation of NK and TC activity was triggered by IL-12 dependent activation (76) although it is not yet clear whether oral administration of ABM extract enhances IL-12 production in vivo (77).

These data are confirmed by a study of Itoh (78) showing moderate antiblastic activity in mice Meth-A tumor model but only by i.p. administration of FIII-2-b fraction, confirmed in another study where a new polysaccharide–protein complex (called ATOM: antitumor organic substance Mie) administered p.o. and i.p. appeared highly active against in mice sarcoma 180, Ehrlich ascites carcinoma, Shionogi carcinoma 42 and Meth A fibrosarcoma models, trough activation of immunostimulatory activity mediated by macrophage and complement (79).

Ehrlich carcinoma-bearing mice treated per os with the n-hexane (mainly unsaturated fatty acids), dichloromethane (sugar and amino acids), or methanol (mainly unidentified polymers) extracts from ABM fruiting bodies were able to maintain the NK activity of spleen cells during the first 10 days after tumor implantation (80). NK activity in these groups was similar to that of normal controls and higher than that of tumor-bearing mice treated with water. After 30 days, animals treated with n-hexane extract showed lower tumor growth than the other groups, but mice assuming dichloromethane extract presented signs of presumed toxicity (necrotic lesions in the extremity of the tail probably due to residues of organic solvents). The dichloromethane and methanol groups produced a more intense humoral response than the n-hexane and ethanol extract groups.

The results of NK activity on the 30th day after the injection of tumor cells suggest that none of the three extracts was able to maintain the lytic activity against Yac-1 target cells. And 30 days later, the Ehrlich carcinoma cells were enough to decrease the NK activity, perhaps, by the production of soluble factors like prostaglandins, TGF-β, or IL-10 (62).



ПРО Экстракты как Иммуностимуляторы
В интересном статье (75), экспериментировать внутрикожные инъекции четырех различных экстрактов ПРО ( этанол, вода , оксалат растворимых и нерастворимых фракций ) в двусторонней Meth -A модели опухоли , мышей, которым вводили растворимой фракции оксалата были опухоли бесплатно после 21 дней . В той же статье , пероральное введение экспромтом из той же фракции не было противоопухолевый эффект , но усиливается , что из интратуморально введенного фракции (P <0,01 по сравнению с только инъекции ) (75) . Значительное макрофагов хемотаксическим фактором , но не нейтрофилов хемотаксическим фактором деятельности , был обнаружен , а сывороточные уровни иммуносупрессивной хемотаксического фактора ( маркер белка активированных макрофагов и нейтрофилов в ответ на модификатор биологической реакции ) вырос очень значительно предлагая иммуногенной активности помимо прямого цитотоксического действия на опухолевые клетки (75) .
Растворимая фракция оксалат состоял из большого количества углеводов ( исключительно глюкоза , как определено с помощью ВЭЖХ ) и небольшие количества белков , углеводов , содержащие (1-4) - β -D- глюкан и (1-6) - β -D- глюкан в соотношении примерно 1 : 2 ( 45,75 ) .
Лечение с горячей водой экстрактов плодовых тел ПРО увеличился NK активность клеток селезенки в наивных BALB / с мышей (75). В Meth A- несущих BALB / с мышей , те же экстракты усиливает индукцию антиген-специфических цитотоксических Т-лимфоцитов и IFN - γ производства. Up- регулирования НК и ТК деятельности было вызвано Ил- 12 зависимой активации (76) , хотя это еще не ясно, повышает ли пероральное введение экстракта ПРО IL-12 производства в естественных условиях (77) .
Эти данные подтверждены при изучении Ито (78) показывает умеренный антибластического активность у мышей Meth -модель опухоли , но только IP Администрация FIII -2- б фракции , подтвердили в другом исследовании , где новый полисахарид - белкового комплекса (так называемый АТОМ : противоопухолевый органическое вещество Мие ) вводят перорально и и.п. появились высокой активностью в отношении саркомы у мышей 180 , асцитной карциномы Эрлиха , Shionogi карцинома 42 и Methмодели фибросаркомы , активация желоб иммуностимулирующей активностью, опосредованной макрофагами и дополнения (79).
Карциномы мышей, несущих Эрлиха , получавших перорально с н-гексаном ( главным образом ненасыщенные жирные кислоты ) , дихлорметан ( сахара и аминокислоты ), или метанол (в основном неизвестные полимеры) извлекает из плодовых тел ПРО были способны поддерживать активность NK клеток селезенки в течение первых 10 дней после имплантации опухоли (80). NK активность в этих группах была такой же, нормальных контролей и выше, чем у мышей, имеющих опухоль обрабатывают водой . Через 30 дней животные, обработанные смесью н-гексан экстракта показали более низкую рост опухоли , чем в других группах , но у мышей , предполагающие экстракт дихлорметана представлены признаки предполагаемой токсичности ( некротических повреждений в оконечности хвоста , вероятно, из-за остатков органических растворителей ) . В дихлорметана и метанола группы производится более интенсивный гуморальный ответ , чем н-гексан и этанол экстракт групп.
Результаты НК деятельности на 30-й день после инъекции опухолевых клеток показывают, что ни один из трех экстрактов не смог сохранить литическую активность против Yac - 1 клеток-мишеней . И 30 дней спустя, клетки карциномы Эрлиха было достаточно, чтобы уменьшить NK активность , возможно , по производству растворимых факторов, таких как простагландины, TGF- β , или IL-10 (62) .

Tumoricidal Acivity of β-Glucan


In a mouse model, for the first time in 2005, Kobayashi (81) has demonstrated that daily oral supplementation of β-glucan by a hydrochloric acid fraction (16.6% proteins, 90% glucose composed by 1-4-α-d-glucan and 1-6-β-d-glucan in the ratio 1 : 2) (82) seems the only orally active preparation in mice with respect to aqueous ammonium oxalate-soluble and ethanol-insoluble derivatives of ABM that are active only if administered intratumorally (83), probably due to a direct effect on tumor invasion and metastasis through a direct modulation of signalling cascades: inhibition of thymidine incorporation in a dose-dependent fashion in ovarian cancer cells in vitro although not in Lewis lung cancer cells. Data in vitro have been confirmed in a mouse model of peritoneally disseminated metastasis of human ovarian cancer by intraperitoneal injection and confirmed by oral administration, without influence on mean body weight or food consumption and the average number of formation of pulmonary nodules was lower on experimental lung metastasis of Lewis lung cancer (81). These actions are probably due to the suppression of cell proliferation, apoptosis and inhibition of urokinase-type plasminogen activator through promotion of p38 MAPK activation (81).

In reference to other popular supposed pharmacological activities, the only experimental data are those from a model (84) of rats with a streptozocin induced diabetes treated by oral administration of a dried fruiting body hot-water extracts showed anti-hyperglycemic, anti-hypertriglyceridemic, anti-hypercholesterolemic and anti-arteriosclerosis activity indicating overall anti-diabetic activity in diabetic rats, but oligosaccharides obtained by hydrolization of β-glucans by means of Bacillus megaterium showed higher activity than β-glucans.

So, many studies show in animals the potential activity of ABM extracts, and more than a direct antiblastic activity. Moreover on the basis of in vitro studies it is possible to assume that the most promising pharmacological activities are immunostimulatory and antiangiogenic probably by means of different extracts (Table 2).




Table 2.

Main active anticancerogenic substances



Противоопухолевый Acivity из β -глюкан
В мышиной модели , впервые в 2005 году, Kobayashi (81) показали, что суточная пероральная добавок β -глюкана на долю соляной кислоты (16,6 % белков , 90% глюкозы состоит из 1 -4- α -D- глюкан и 1 -6- β -D- глюкан в соотношении 1: 2 ) (82) кажетсятолько перорально активный препарат на мышах по отношению к водной аммония оксалата растворимые и нерастворимые в этанол производных ПРО , которые активны только тогда, когда вводили внутрь опухоли (83), вероятно, связано с непосредственным воздействием на опухолевой инвазии и метастазирования через прямой модуляции сигнальных каскадов : ингибирование тимидина в зависимости от дозы образом в клетках рака яичников в пробирке хотя и не в Льюис клеток рака легких . Данные в пробирке были подтверждены в мышиной модели перитонеально распространяемой метастазирования рака яичников человека по внутрибрюшинного введения и подтверждено перорального применения , без влияния на средней массы тела или потребления продуктов питания и среднее число формирования легочных узелков была ниже на экспериментальной легких метастазирование рака легких Льюиса (81). Эти действия , вероятно, из-за подавления пролиферации клеток , апоптоз и ингибирование урокиназного активатора плазминогена через продвижение активации МАРК р38 (81).
Со ссылкой на других популярных предполагаемых фармакологических активностей , только экспериментальные данные являются те из модели (84) крыс с индуцированной в стрептозоцином диабета , обработанной перорального введения высушенных экстрактов плодового тела горячей водой показали анти- гипергликемии , анти- гипертриглицеридемией , анти- гиперхолестеринемией и анти- атеросклероз деятельности с указанием общей антидиабетической деятельность в диабетических крыс , но олигосахариды , полученные hydrolization из β -глюканы с помощью Bacillus megaterium показали более высокую активность , чем β -глюканы .
Так , многие исследования показывают, у животных потенциальную активность экстрактов ПРО , и более прямым антибластического деятельности . Кроме того, на основе исследований в пробирке можно предположить, что наиболее перспективными фармакологических активностей вл иммуностимулирующий и антиангиогенная вероятно с помощью различных экстрактов (табл. 2) .
Таблица 2.
Основные активные противоракового вещества
1   ...   9   10   11   12   13   14   15   16   ...   54


База данных защищена авторским правом ©vossta.ru 2019
обратиться к администрации

    Главная страница