Нарушени я и коррекция микробиоценоза влагалища у беременных при неблагоприятных факторах внешней среды 14. 01. 01 Акушерство и гинекология (мед науки)



страница1/3
Дата29.05.2018
Размер0.55 Mb.
#26008
ТипАвтореферат
  1   2   3

На правах рукописи
МАЙСУРАДЗЕ ЛИАНА ВАСИЛЬЕВНА

нарушения и коррекция МИКРОБИОЦЕНОЗА ВЛАГАЛИЩА У БЕРЕМЕННЫХ ПРИ НЕБЛАГОПРИЯТНЫХ ФАКТОРАХ ВНЕШНЕЙ СРЕДЫ

14.01.01 - Акушерство и гинекология (мед.науки)

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

доктора медицинских наук


Москва- 2013

Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Северо-Осетинская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГБОУ ВПО СОГМА Минздравсоцразвития России)



Научный консультант:

доктор медицинских наук, профессор ЦАЛЛАГОВА Лариса Владимировна



Официальные оппоненты:

Серов Владимир Николаевич - Академик РАМН, доктор медицинских наук, профессор (ФГБУ «Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии РАМН» им. В.И. Кулакова Минздрава России, Главный научный сотрудник)

Макаров Игорь Олегович - доктор медицинских наук, профессор(ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И. М. Сеченова» Минздрава России, заведующий кафедрой акушерства и гинекологии ФППОВ)

Цахилова Светлана Григорьевна - доктор медицинских наук, профессор (ГБОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет» имени А.И.Евдокимова Минздрава России, профессор кафедры акушерства и гинекологии стоматологического факультета).

Ведущее учреждение: ГБОУ ВПО «Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н. И. Пирогова» Минздрва России

Защита состоится «___» ___________2013__ в ___ часов на заседании диссертационного совета Д 208.041.06, созданный на базе ГБОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет имени А.И.Евдокимова» Минздрава России по адресу: 127473, Москва, ул. Делегатская д.20 стр.1

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Московского государственного медико-стоматологического университета имени А.И. Евдокимова (127206,г.Москва,ул.Вучетича, д.10а)

Автореферат разослан ___ ______________ 2013 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета

доктор медицинских наук Ю.Н.Пономарева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Инфекционно-воспалительные заболевания продолжают оставаться одной из актуальных проблем современного акушерства. Среди причин, приводящих к развитию воспалительных осложнений во время беременности, важную роль играют дисбиотические заболевания влагалища. При этом необходимо учитывать, что сама беременность является фактором риска развития дисбиоза влагалища, вызываемой условно-патогенной микрофлорой и микроорганизмами со слабой вирулентностью. (И.В. Берлев, 2009., А.С. Анкирская, Б.Л. Гуртовой, 2010., А.Н. Стрижаков, 2010., Е.Ф. Кира, 2011). Особую опасность нарушения микрофлоры родовых путей представляют для беременных, так как могут явиться причиной прерывания беременности, преждевременных родов, внутриутробного инфицирования плода и послеродовых септических заболеваний матери. Эти заболевания встречаются преимущественно у женщин детородного возраста, что обусловливает экономическую и социальную значимость проблемы. (В.И. Кулаков, 2004., Н.В. Орджоникидзе и соавт., 2011, А.Л.Тихомиров, 2012).

За последние 30 лет существенно изменилась клиническая характеристика инфекционных заболеваний женских половых органов, в чем сказываются последствия повсеместного применения антимикробных препаратов, а также неблагоприятных факторов окружающей среды, существенно влияющих на здоровье человека. (З.В. Малышева, 2003., С.И. Воронова, 2004., Л.И. Васильева, Н.А. Григорян, 2004., В.Н. Серов и соавт., 2005). Репродуктивная система человека одна из первых реагирует на любое неблагоприятное воздействие окружающей среды. В индустриально развитых странах среди множества антропогенных факторов наибольшую проблему представляют предприятия цветной металлургии, являющиеся источниками загрязнения окружающей среды солями тяжелых металлов (медь, свинец, кадмий, цинк), превышение предельно допустимых концентраций которых в воздухе, воде и почве значительно увеличивает риск развития репродуктивной и перинатальной патологии. Тяжелые металлы могут в определенных случаях выступать в роли ведущего экологического фактора, определяющего характер и направление развития биогеоценозов. Массированное загрязнение ими внешней среды приводит к катастрофическим последствия для человека, и прежде всего сказываются на здоровье женщин и детей. Это выдвигает в число важных задач проведение мероприятий по повышению качества профилактики нарушений репродуктивного здоровья, в ранней диагностике и прогнозирования возможного неблагоприятного воздействия факторов внешней среды на организм женщины и ее потомство (Краснопольский В.И., 2005., Вельтищев Ю.Е., 2008., Сивочалова О.В., 2010).

В результате раннее проведенных исследований доказано, что особое значение в генезе плацентарной недостаточности отводится инфекции. Как следствие данной патологии является высокая частота нарушений внутриутробного развития плода (гипотрофия, внутриутробное инфицирование, гипоксия плода), что подтверждается изменениями функции плаценты при морфологическом исследовании (Е.А. Бутова, 2006., Т.Ю. Пестрикова, Е.А. Юрасова, 2008., J. Reid, 2009., В.Л. Тютюнник, 2011).

В условиях физиологического иммунодефицита, наблюдаемого при беременности, когда нарушается равновесие между вирусом и защитными иммунологическими механизмами, происходит активация вирусного инфекционного процесса. Невосприимчивость к вирусной инфекции обеспечивает система интерферонов. Основное свойство интерферонов обусловлено нарушением процесса репликации инфекционного агента в клетках. При дисбиотических нарушениях влагалища отмечается снижение Т – и В – клеточного звена иммунитета, кроме того, достоверно чаще имеет место подавление интерфероногенеза, при этом фоновые показатели сывороточного интерферона (ИФН) сочетаются со сниженной способностью иммуноцитов формировать альфа – и гамма ИФН, что по данным литературы характерно для длительно текущего хронического инфекционного процесса. (Ю.В. Цвелев, 2008., Л.И. Васильева, 2009., Н.А. Григорян, 2010). Нарушение интерферонового статуса с разной степенью повышения титра циркулирующего интерферона в сочетании с подавлениями альфа – гамма звеньев позволяет судить об имеющемся в организме остром инфекционном процессе. (Л.В. Антонова, С.С. Григорян, 1996., Т.Б. Касохов, Ю.В. Вельтищев, 1999). В тоже время, остается неясным, что является первичным при данной патологии – дисбиотические изменения или нарушения в иммунной системе.

Это позволяет считать снижение иммунитета матери одним из звеньев патологической цепи в формировании инфекционно-воспалительных заболеваний матери, плода и новорожденного (А.В. Мещерякова, 2005., Н.К. Б.Л. Гуртовой, 2007., Л.В. Ванько, 2009., И.В. Медянников, 2009). В связи с этим, актуальным является изучение роли дисбиотических нарушений влагалища в развитии гестационного процесса, их взаимосвязь с функционированием иммуногомеостаза, фетоплацентарного комплекса в условиях экологического неблагополучия. Таким образом, система интерферона ответственна за «генетический» гомеостаз, так как защищает организм от проникновения чужеродной генетической информации. Помимо противовирусного действия интерфероны обладают широким набором иммунобиологических эффектов. (В.Ф. Долгушина, 2001., Е.А. Шевченко, 2002., J. Ranton et al., 2002., Э.Г. Григорян, 2003., В.И. Кулаков и соавт., 2005).

Применяемые антибактериальные препараты, наряду с противовоспалительным эффектом, вызывают нарушение иммунного статуса организма, подавляют чувствительную сапрофитную микрофлору и нарушают антагонистические взаимоотношения внутри микробных ассоциаций, населяющих влагалище, в результате чего создаются благоприятные условия для развития инфекции. Разработка новых высокоэффективных методов лечения и профилактики иммунных нарушений у беременных группы риска позволит снизить материнскую и детскую заболеваемость, что имеет как медицинское, так и социальное значение.



Цель исследования. Оптимизация патогенетически обоснованных подходов к диагностике, профилактике и лечению нарушений вагинального микроценоза у беременных, проживающих в условиях экопатогенного воздействия солей тяжелых металлов, что позволит снизить частоту осложнений гестационного периода и улучшить перинатальные исходы.
Основные задачи исследования:

  1. Изучить видовой спектр условно патогенных микроорганизмов у беременных с нарушениями вагинального биотопа и при нормоценозе.

  2. Определить зависимость между дисбиотическими нарушениями у беременных и частотой осложнений гестационного периода у женщин в условиях экологического неблагополучия.

  3. Установить влияние неблагоприятных экологических факторов на состояние вагинальной микрофлоры у беременных.

  4. Выявить частоту дисбактериоза кишечника у беременных с бактериальным вагинозом.

  5. Изучить изменение показателей общего и местного иммунитета у беременных с бактериальным вагинозом, проживающих в условиях «опасного» и «допустимого» загрязнения.

  6. Проанализировать содержание цитокинов для уточнения их роли в патогенезе дисбиотических нарушений влагалища и риска внутриутробного инфицирования плода.

  7. Выявить возможные цитогенетические эффекты металлополютантов на организм беременных с бактериальным вагинозом.

  8. Изучить активность ферментов антиоксидантной системы и перекисного окисления липидов у беременных с бактериальным вагинозом.

  9. Определить влияние инфекционных поражений последа на фетоплацентарный комплекс и состояние новорожденного.

  10. Разработать алгоритм диагностики, лечения и профилактики бактериального вагиноза у беременных и определить их эффективность.

Научная новизна работы. Установлены новые закономерности развития вторичной иммунной недостаточности у беременных с вагинальными дисбиозами, проживающих на территории избыточного загрязнения металлополютантами. Экспериментально установлено, что при концентрации солей тяжелых металлов (свинец, кадмий, цинк) свыше 50 мкг/100 мл в сыворотке крови у беременных женщин наблюдается снижение показателей интерферонового статуса и фагоцитоза, как наиболее чувствительных к воздействию металлополютантов.

В качестве скринингового исследования у беременных группы риска предложено изучение показателей интерферонового статуса, уровней провоспалительных цитокинов, фагоцитарной активности. Доказана роль иммунной системы в возникновении вагинальных дисбиозов у беременных-жительниц из районов экологического неблагополучия, выявлены возможные точки приложения селективной иммунокоррекции для профилактики рецидива заболевания.

Впервые в качестве прогностического критерия для формирования групп беременных «высокого риска» по возникновению бактериального вагиноза в условиях комбинированного воздействия металлополютантов использовано определение показателей иммуногомеостаза, уровней хромосомных аберраций, активности ферментов антиоксидантной системы, перекисного окисления липидов, изучение гормональной функции плаценты, микроэлементного состава биосубстратов (кровь, моча, волосы).

Получены данные, свидетельствующие о нарушении функции фето-плацентарного комплекса и проницаемости фето-плацентарного барьера для токсичных микроэлементов у беременных с бактериальным вагинозом, проживающих в зоне «опасного» загрязнения. Разработана система мероприятий по профилактике и лечению бактериального вагиноза у беременных, подверженных воздействию солей тяжелых металлов.



Практическая значимость. Эпидемиологические исследования позволили разработать алгоритм обследования и наблюдения беременных с нарушениями микробиоценоза влагалища, проживающих вблизи промышленных предприятий цветной металлургии. Результаты исследования подтверждают данные о механизме действия цитокинов в формировании иммунного ответа у беременных с бактериальным вагинозом, прогнозировании внутриутробного инфицирования плода и предпосылки для своевременной коррекции экологозависимых состояний.

Прогнозирование инфекционной патологии у беременных и новорожденных из районов экологического неблагополучия способствовало выявлению доклинических форм плацентарной недостаточности. Показаны уровни нарушения и продукции гормонов плаценты в различные сроки беременности, что обуславливает формирование групп риска по развитию плацентарной недостаточности в условиях воздействия металлополютантов. При морфологическом исследовании плаценты определены критерии адекватности проводимых лечебно-профилактических мероприятий у беременных с бактериальным вагинозом.

На основании клинико-экспериментальных исследований обоснована необходимость включения в комплексное лечение бактериального вагиноза у беременных, проживающих в зоне экологического неблагополучия, иммуномодулирующих препаратов Кипферон и Трансфер Фактор с указанием оптимальных сроков, этапности и длительности проведения лечебных мероприятий. По результатам проведенных исследований подготовлены методические рекомендации для врачей акушеров-гинекологов по своевременной диагностике нарушений вагинальной микрофлоры у беременных, проживающих на территории избыточного загрязнения солями тяжелых металлов, с применением современных иммунокоррегирующих препаратов и метаболитов широкого спектра действия (глицин, лимонтар) в целях дальнейшей профилактики и лечения вагинальных дисбиозов.

Основные положения, выносимые на защиту:


  1. Бактериальный вагиноз чаще развивается у беременных, проживающих в экологически неблагоприятных районах и являются следствием вторичной иммунной недостаточности. Нарушения микроэкологии влагалища у беременных при воздействии металлополютантов сопровождаются цитогенетическими эффектами и изменениями механизмов свободно-радикальных процессов.

  2. Принципы патогенетически обоснованной системы мероприятий по предупреждению патологии репродуктивного здоровья и перинатальных осложнений в условиях экологической нагрузки включают исследование иммуногомеостаза, определение уровня плацентарных белков и гормонов, генетического мониторинга, исследование факторов неспецифической резистентности организма новорожденного и микроэлементного состава биосубстратов.

  3. Предложенная схема этапной комбинированной терапии бактериального вагиноза у беременных с применением иммуномодуляторов Кипферон и Трансфер Фактор и метаболитов широкого спектра действия (глицин, лимонтар) повышает эффективностью лечения и существенно снижают материнскую и перинатальную заболеваемость.

Внедрение результатов работы в практику. Результаты исследования и разработанные на их основе рекомендации внедрены в практическую деятельность отделения патологии родильного дома № 2 г. Владикавказа, женской консультации поликлиники № 1, женской консультации № 2. Опубликовано информационное письмо: «Эффективность применения иммуномодулирующего препарата «Кипферон» в комплексной терапии бактериального вагиноза у беременных». Оформлен акт внедрения в практику родовспомогательных учреждений РСО-Алания «Применение препарата «Кипферон» в профилактике и лечении вагинальных дисбиозов у беременных высокого риска послеродовых инфекционных осложнений».

Получен патент «Способ лечения эндометрита в послеродовом периоде» (№ 2004120696/ 14 (022222) от 06.07.2004). Получен приоритет (заявка № 2004132 798 / 14 (035699) от 10.11.2004) к заявке о выдаче патента «Способ профилактики и лечения фетоплацентарной недостаточности». Материалы диссертации включены в учебный курс для студентов, интернов и клинических ординаторов кафедры акушерства и гинекологии ГБОУ ВПО СОГМА Минздравсоцразвития России..



Апробация работы и личное участие автора. Основные положения диссертации доложены на научно - практической конференции «Актуальные вопросы акушерства, гинекологии и педиатрии» (г. Ростов - на Дону, 2004)., на съезде акушер – гинекологов Южного Федерального Округа (г. Ростов – на Дону, 2005)., Северо - Кавказской научно - практической конференции «Актуальные вопросы современной хирургии» (г. Нальчик, 2006), II Всероссийской конференции с международным участием «Новые информационные технологии в медицине» (г. Волгоград, 2007), I Международном семинаре «Инфекции в акушерстве и перинатологии (г. Москва, 2007)., YI Международной конференции «Инновационные технологии для устойчивого развития горных территорий (г.Владикавказ, 2007), II Международном конгрессе «Репродуктивное здоровье семьи» (г.Москва, 2008)., I Международном научно - практической конференции «Здоровье и образование в ХХI веке» (г. Москва, 2008 )., 10-й юбилейной научной сессии, посвященной 70 - летию СОГМА (г. Владикавказ, 2009)., YII Международной конференции «Развитие производственной и экологической безопасности в ХХI веке: Белые ночи (Санкт - Петербург, 2009), YII Международной конференции «Устойчивое развитие горных территорий в условиях глобальных изменений» (г.Владикавказ, 2010), 5 региональной научно- практической конференции «Новые технологии в рекреации здоровья населения» (г.Владикавказ,2011), конференциях кафедр акушерства и гинекологии ФПДО и акушерства и гинекологии ГБОУ ВПО «Северо - Осетинская государственная медицинская Академия Мнздравсоцразвития России. Лично автором выполнен набор материала, анализ состояния вопроса по данным современной литературы и анализ полученных результатов.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 45 научных работ, в том числе 2 монографии, 19 работ в изданиях рекомендуемых ВАК, в т.ч.1 патент.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 345 страницах и содержит введение, обзор литературы, материалы и методы, собственные исследования, заключение, выводы, практические рекомендации. Библиографический указатель включает 357 отечественных и 128 иностранных источников литературы. Работа иллюстрирована 73 таблицами и 18 рисунками.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования

Для решения поставленных задач было обследовано 200 беременных, проживающих в различных экологических зонах г. Владикавказа:100 беременных в зоне «опасного» загрязнения тяжелыми металлами (1-2 км от предприятия цветной металлургии) и 100 беременных – в зоне «допустимого» загрязнения (3-40 км от завода «Электроцинк»).

В целях выявлении частоты различных форм вагинальных дисбиозов на основании эпидемиологических, клинико-анамнестических и лабораторных данных 100 беременным, проживающим в районе «опасного» загрязнения, был установлен диагноз «бактериальный вагиноз» 52 пациенткам (52 «неспецифический вагинит» – 20 пациенткам (20%), «вагинальный кандидоз» – 15 беременным (15%), «условно норма»- 13 женщинам (13%). Из 100 беременных, проживающим в зоне «допустимого» загрязнения, был установлен диагноз «бактериальный вагиноз» – 28 пациенткам (28%), «неспецифический вагинит» – 26 беременным (26%), «вагинальный кандидоз» – 16 беременным (16%), «условно норма» - 30 женщинам (30%). Таким образом, почти в два раза чаще бактериальный вагиноз встречался у беременных, проживающих в зоне «опасного» загрязнения, по сравнению с женщинами из зоны «допустимого» загрязнения, что и послужило поводом для исследования бактериального вагиноза у беременных, проживающих на территориях, загрязненных тяжелыми металлами (свинец, кадмий, цинк).

В ходе дальнейшего исследования под наблюдением находилось 250 беременных с бактериальным вагинозом, проживающих в различных экологических зонах г. Владикавказа. Из них 1 (основную) группу составили 200 беременных, проживающих в районе 1-2 км от предприятия цветной металлургии. II группа (контрольная) включала 50 беременных с бактериальным вагинозом, являющимися жительницами относительно благоприятных районов. В Ш группу (сравнения) вошли 50 беременных с нормальным биоценозом влагалища, являющимися жительницами районов экологического благополучия.

В процессе обследования и лечения основная группа беременных (200 женщин) была разделена на 3 подгруппы: в 1 подгруппу вошли 65 беременных, получавших во II и III триместрах монотерапию 2 % кремом далацин, во 2 подгруппе (72 пациентки) назначали комплексное лечение 2 % вагинальным кремом далацин на фоне применения иммуномодулирующего препарата Кипферон, в 3 подгруппе (63 пациентки) проводилась этапная иммуномодулирующая терапия с применением препаратов Кипферон и Трансфер Фактор. Кроме того, беременным всех трех подгрупп на втором этапе лечения с целью восстановления биоценоза влагалища применяли ацилакт интравагинально по 1 свече 2 раза в день в течение 14 дней. Параллельно беременным с выявленным дисбактериозом кишечника в зависимости от степени выраженности процесса проводилась его коррекция приемом ацидофлоры, бифиформа или бактисубтила. Беременные II группы (контрольная) получали традиционное лечение бактериального вагиноза (2 % вагинальный крем далацин и на II этапе лечения свечи ацилакт интравагинально.

На каждую беременную заполняли специально разработанную анкету, которая позволяла учитывать данные анамнеза, полученные результаты обследования и лечения. Проведена сравнительная оценка течения беременности, родов, послеродового периода у женщин в исследуемых группах. Для изучения перинатальных показателей проведено изучение 200 историй развития новорожденных. Общее состояние новорожденных оценивали по шкале Апгар, определяли состояние физического развития ребенка (масса тела, рост, окружность головы, груди), сроки отпадения остатка пуповины, заболеваемость новорожденного, а также сроки выписки из родильного дома.

Всем беременным проводились общеклинические, гинекологические, бактериологические, иммунологические, генетические, биохимические и инструментальные методы исследования. Микроскопия отделяемого влагалища с окраской по Граму проводилась по технологии световой иммерсии под 90-кратным увеличением. Скрининговые методы включали оценку ph влагалищного отделяемого, аминотест, обнаружение «ключевых клеток». Микробиологическое исследование отделяемого заднего свода влагалища проводили до и после лечения. При культуральном исследовании определяли видовой и количественный состав всех ассоциантов микроценоза изучаемых образцов.

Для выделения энтеробактерий использовали среду MacConkey agar или Эндо агар. Материал из выросших колоний отсевали для получения чистой культуры и дальнейшей идентификации, которую проводили на стандартной системе API – 20Е. Для выделения стафилококков использовали желточно-солевой агар или Staphylococcus agar 110. Для идентификации стафилококков до вида использовали стандартную систему API – 20 Staph. Выделение групп аэробных стрептококков производили на кровяном агаре с полимиксином. Для биохимической идентификации стрептококков использовали системы API – 20 Strept. Грамположительные анаэробные кокки выделяли на среде Columbia agar Base с добавлением бараньей крови (5 %), витамина К, гемина, фенилэтилалкола (2,5 г/л) или налидиксоновой кислоты (10 мг/л) и колистина (10 мг/л).

Анаэробные кокки идентифицировали по их биохимическому профилю с применением биохимической идентификационной системы rapid ID 32 A. Определение чувствительности выделенных штаммов производили традиционным способом дисков с использованием автоматического диспенсера фирмы Himedia (Индия) (Сидоренко С.В., 1998; Поляк М.С., 2003).

Метод полимеразной цепной реакции использовали для выявления таких бактериальных и вирусных патогенов как Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealiticum, Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium, Neisseria gonorrhea, Herpes 1 and 2, G. Vaginalis, CMV, папилломавирус, трихомонада, с использованием наборов реагентов производства НПФ «Литех» НИИ ФХМ, г. Москва.

Ультразвуковое (УЗ) исследование фето - плацентарного комплекса проводили при помощи аппарата «Aloka – SD 500» (Япония) и «Sim– 500 U plus» (Италия) с использованием конвексных и секторальных трансдьюссеров с частотой 3,5 и 5 МГц. Ультразвуковое исследование фето - плацентарного комплекса включало в себя: проведение УЗ – фетометрии, плацентографии, определение количества околоплодных вод, определение степени зрелости легочной ткани, выявление УЗ маркеров внутриутробного инфицирования, пренатальную диагностику задержки внутриутробного развития плода. УЗ- плацентография включала в себя определение локализации плаценты, измерение ее толщины, установление степени зрелости и оценку структурных изменений.

Кардиотокография осуществлялась на кардиомониторе «Partecust» фирмы «Siemens» ФРГ. Кардиотокография проводилась до и после лечебно- профилактических мероприятий. Допплерометрическая регистрация маточно – плацентарного кровотока у беременных исследуемых групп проводилась с использованием ультразвукового диагностического прибора Toshiba (Eccocee) SSA-340 A (Япония) путем активирования функции цветного доплеровского картирования.

Содержание субпопуляций лимфоцитов определяли методом непрямой иммунофлюоресценции с использованием моноклональных антител к маркерам CD 3, CD 7, CD 8 (производство «МедБиоСпектр»). Определение уровня основных классов иммуноглобулинов G, М, А - проводилось методом радиальной иммунодиффузии по Mancini et. al., (1968). За нормальные возрастные значения плазматического (сывороточного) уровня иммуноглобулинов всех классов приняты данные Д.В. Стефани и Ю.Е. Вельтищева (1998).

Проводилось определение интерферонового статуса крови по методу С.С. Григоряна и Ф.И. Ершова (1988). При этом исследовали:



  1. содержание сывороточного интерферона (сыв. ИФН);

  2. способность лейкоцитов к продукции альфа-интерферона - интерфероновая реакция лейкоцитов при индукции ее вирусом болезни Ньюкасла или фитогеммаглютинином;

  3. способность лимфоцитов к продукции гамма-интерферона при индукции стафилококковым энтеротоксином. Исследования проводились в лаборатории онтогенеза и коррекции системы интерферона НИИЭ им. Н.Ф. Гамалея (г. Москва). За возрастные нормативы приняты данные В.В. Малиновской (1990).

Уровень цитокинов (ИЛ-1, ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-10, ФНО α) определяли с использованием коммерческих тест-систем «ProCon» («Протеиновый контур», Санкт-Петербург). Содержание цитокинов в сыворотке крови измеряли методом «сендвич» - варианта твердофазного иммуноферментного анализа с помощью двойных антител. В качестве стандарта для сравнивания в каждой реакции использовали рекомбинантные цитокины, входящие в состав тест-наборов.

Исследование фагоцитоза проводили определяя фагоцитарную активность нейтрофилов способом Настенко с соавт. (1979). Определение показателей фагоцитоза и интерферонового статуса крови в условиях инкубации в присутствии солей металлов – свинца, кадмия, цинка моделировали in vitro (оригинальная методика Т.Б. Касохова).

Для изучения состояния местного иммунитета влагалищной жидкости методом радиальной иммунодиффузии изучали содержание иммуноглобулинов классов А, М, G, белков острой фазы (церулоплазмина, трансферрина, комплемента).

Перекисное окисление липидов (ПОЛ) и антиоксидантную активность (АОА) в сыворотке крови определяли методом индуцированной хемилюминесценции в супернатанте (M. Uchiyma, 1978). Учет хромосомных аберраций (ХА) проводили в лимфоцитах периферической крови человека по общепринятой методике. (Моorched P.S. et. аl., 1960).

Для изучения функционального состояния фето-плацентарной системы определяли содержания плацентарного лактогена и трофобластического β-глобулина иммунохимическим способом с применением метода двойной диффузии в агаровом геле по Оухтерлони (1958), в модификации Н.И. Храмковой и Г.И. Абелева. Экскрецию эстриола с мочой определяли с использованием экспресс - метода Брауна.

Гистологическое исследование плаценты осуществляли при помощи аппарата «Histokinetta», (Leica, Германия). Серийные срезы толщиной 3 мкм изготавливались на микротоме (MR 2055, Leica, Германия). Полученные срезы окрашивали гематоксилином и эозином, PAS – реакция с использованием набора реагентов Sigma Diagnostics Periodic Acid-Schiff (PAS). Для иммуногистохимического метода использовался набор реактивов En Vision TM+ System фирмы DAKO.

Изучение влияния техногенного загрязнения окружающей среды на здоровье женщины проводилось по методике «Экоскан», разработанной Институтом Минералогии, Геохимии и Кристаллоохимии Редких Элементов (ИМГРЭ). В процессе проведения комплексных эколого-геохимических и медико-биологических исследований предусматривается изучение трех уровней экологических систем. По данным картирования на территории города Владикавказа выделено 4 условных зоны техногенного загрязнения с преобладанием тяжелых металлов (свинец, цинк, медь, кадмий). По степени общего загрязнения почв и воздушного бассейна тяжелыми металлами по мере отдаления от предприятий цветной металлургии, выделены районы с допустимым, умеренно опасным, опасным и чрезвычайно опасным загрязнением. Зона чрезвычайно опасного загрязнения соответствует территориям заводов «Электроцинк» и «Победит». Использованы данные Управления природных ресурсов и охраны окружающей среды МПР России по РСО - Алании о загрязнении почвы, воды и воздуха г. Владикавказа.

Для статистической обработки данных использовали методы: получение средних значений и средне – квадратичных ошибок, Т – критерий Стьюдента, а также непараметрические критерии статистики (критерий Хи – квадрат) для сравнения малых выборок (Е.В. Гублер, А.А. Генкин, 1973). Для расчета этих параметров была использована программа SPSS 13.0 for Windows – программа определения статистических параметров, необходимых при обработке исходной информации и согласовании ее с параметрами других клинических и инструментальных исследований. При обработке данных использован персональный компьютер Phemom™ II X2 550. Программы реализованы в среде электронных таблиц Excel 5.0 и 7.0.


Каталог: userdata -> manual -> doc -> nauka -> avtoref -> 2013
2013 -> Течение и исходы беременности, осложнившейся отслойкой хориона 14. 01. 01 Акушерство и гинекология
2013 -> Трансуретральная резекция предстательной железы при повышенном уровне простатспецифического антигена 14. 01. 23 Урология (мед науки)
2013 -> Эффективность использования эластичных штифтов и композитных материалов для реконструкции разрушенных зубов после эндодонтического лечения 14. 01. 14 Стоматология (мед науки)
2013 -> Возможности мультиспиральной компьютерной гистеросальпингографии в диагностике маточного и трубно-перитонеального факторов бесплодия 14. 01. 01 Акушерство и гинекология
2013 -> Выбор имплантологической системы при атрофии альвеолярного отростка верхней челюсти в дистальных отделах 14. 01. 14 «Стоматология»
2013 -> Материалы и методы
2013 -> Сравнительная оценка эффективности применения углекислотного и эрбиевого лазеров и традиционного метода лечения пациентов с гнойно-воспалительными заболеваниями челюстно-лицевой области 14. 01. 14 «Стоматология»
2013 -> Особенности ведения пациентов со слюнно-каменной болезнью при патологии щитовидной железы 14. 01. 14 «Стоматология» 14. 01. 02 «Эндокринология»
2013 -> Лучевые повреждения мочевого пузыря и интерстициальный цистит (клинико-морфологическое обоснование роли гбо) 14. 01. 23 урология


Поделитесь с Вашими друзьями:
  1   2   3




База данных защищена авторским правом ©vossta.ru 2023
обратиться к администрации

    Главная страница