Вопросы к экзамену по дисциплине «Основы генетической инженерии»



страница1/4
Дата21.01.2018
Размер1.15 Mb.
ТипВопросы к экзамену
  1   2   3   4

Вопросы к экзамену по дисциплине «Основы генетической инженерии»

1.Рекомбинантные ДНК и определение генной инженерии.

2.Основные виды мутаций ДНК in vitro.

3.Общая схема клонирования рекомбинантных ДНК.

4.Роль генной инженерии в молекулярно-биологических и генетических исследованиях.

5.Различные способы получения замен нуклеотидов (дезаминирование цитозина, включение аналогов нуклеотидов и др.).

6.Роль генной инженерии в медицине, сельском хозяйстве и промышленности.

7.Мутагенез ДНК In vitro с помощью олигонуклеотидов заданной последовательности. Химический синтез олигонуклеотидов.

8.Характеристика репрессоров как элементов, контролирующих синтез индуцибельных ферментов.

9.Оперонная организация бактериальных генов. Модель Ф. Жакоба и Ж. Моно на примере лактозного (lac) оперона.

10.Процессинг первичных транскриптов эукариотических генов. Альтернативный сплайсинг.

11.Клетки растений в культуре: каллусы, суспензии клеток, протопласты. Создание гибридных растений путем слияния протопластов.

12.Участки прокариотических генов, важные для регуляции транскрипции и трансляции (промоторы, последовательность Шайна-Дальгарно и др.).

13.Корончатые галлы – опухоли, индуцируемые некоторыми почвенными бактериями. Плазмиды, индуцирующие опухоли.

14.Характеристика Ti-плазмид. Интеграция Т-ДНК с хромосомой растений.

15.Использование ДНК Ti-плазмиды в качестве вектора. Менделевское наследование Т-ДНК.

16.Повторяющиеся последовательности эукариотических ДНК.

17.Характеристика ферментов рестрикции, их классификация. Изошизомеры.

18.Инсерционные последовательности (IS) и транспозоны (Tn) бактерий (на примере Tn3).

19.Методы трансформации растительных протопластов, клеток и тканей.

20.Механизм аттенуации транскрипции на примере триптофанового оперона.

21.Рестрикционные карты и рестрикционные фрагменты. Принцип метода гибридизации нуклеиновых кислот.

22.Основные системы «вектор-хозяин» у прокариот. Основные свойства векторов.

23.Использование Т-ДНК для выделения генов растений. Практическое применение генной инженерии растений с использованием Ti-плазмид.

24.Основные методы секвенирования ДНК. Каковы принципы каждого из этих методов?

25.Каулимовирусы и вирус мозаики цветной капусты (CaMV) как наиболее перспективные вирусные векторы для введения генов в растения.

26.Прием встраивания вирусной ДНК в геном растения с помощью Т-ДНК агробактерии – «агроинфекция».

27.Использование рестриктаз для получения «библиотек» рекомбинантных ДНК. Клонирование фрагментов ДНК «методом дробовика».

28.Использование вирусных регуляторных последовательностей (промоторы, энхансеры) для экспрессии генов, вводимых в растения.

29.Клонирование рекомбинантных ДНК с помощью векторов на основе бактериофага l.

30.Преимущества дрожжей для генетических исследований и для изучения регуляции экспрессии эукариотических генов.

31.Плазмиды дрожжей. Повышение эффективности трансформации с помощью дополнительных точек начала репликации (элементов автономной репликации, ЭАР).

32.Клонирование ДНК в фаге М13; основное его преимущество.

33.Использование плазмидных генов устойчивости к антибиотикам для селекции клонированных рекомбинантных ДНК.

34.Использование радиоактивных зондов для обнаружения клонированных генов. Основные методы получения радиоактивных нуклеиновых кислот (ник-трансляция, мечение 5’- и (или) 3’-концов).

35.Общая характеристика ДНК-содержащих онкогенных вирусов на примере вирусов SV40 и полиомы.

36.Направленное встраивание клонированной ДНК в хромосомы дрожжей.

37.Синтез и клонирование комплементарных ДНК (кДНК). Характеристика фермента обратной транскриптазы.

38.Особенности экспрессии ранних (T- и t-белки), а также поздних (VP1-, VP2-, и VP3-белки) генов вируса SV40.

39.Организация РНК-содержащих онкогенных вирусов (ретровирусов). Провирусная ДНК, длинные концевые повторы (LTR).

40.Особенности трансляции эукариотических мРНК. Процессинг новосинтезированных белков.

1.Рекомбинантные ДНК и определение генной инженерии.

Генная инженерия – это ряд специальных методов, связанных с манипулированием генами (ДНК) и созданием генно-инженерных конструкций. С помощью генно-инженерных методов создаются рекомбинантные молекулы ДНК, сконструированные in vitro в соответствии с определенными научными целями. Отбор и клонирование рекомбинантных ДНК является основой биотехнологических процессов, картирования хромосом, секвенирования геномов, манипулирования генами и коррекции генома с целью лечения наследственных болезней человека.

Генная инженерия зародилась в начале 70-х годов и добилась больших успехов. В 1978 г. впервые был получен инсулин генно-инженерным методом, а в 1980 г. была разработана технология получения соматротропина.

Принципы генетической инженерии

- Конструирование рекомбинантных молекул ДНК.

- Перенос рекомбинантной ДНК в клетки или вирусные частицы.

- Клонирование и амплификация рекомбинантной ДНК в клетках.

Рекомбинантная ДНК - ДНК, полученная в результате объединения молекулы векторной ДНК, способной к репликации в определенной клетке-хозяине, с ДНК, кодирующей продукт, синтез которого желательно осуществить в этой клетке-хозяине. Векторы для получения рекомбинантных ДНК могут быть плазмидами, вирусами или искусственными хромосомами на основе дрожжевых или животных хромосомных элементов. Существует большой набор различных систем, позволяющих осуществлять экспрессию гетерологичных генов в бактериях, дрожжах и других организмах, включая клетки человека.

Часто эксперименты с рекомбинантной ДНК проводят по следующей схеме:

-из организма - донора нужных генов экстрагируют нашивную (чужеродную, клонируемую) ДНК; подвергают ее ферментативному гидролизу (расщепляют, разрезают) и соединяют (лигируют, сшивают) с другой ДНК (вектор для клонирования) с образованием новой рекомбинантной молекулы (конструкция «клонирующий вектор - встроенная

ДНК»);

-эту конструкцию вводят в клетку-хозяина (реципиент), где она реплицируется и передается потомкам. Этот процесс называется трансформацией;



-идентифицируют и отбирают клетки, несущие рекомбинантную ДНК (трансформированные клетки);

-получают специфический белковый продукт, синтезированный клетками - хозяевами, что служит подтверждением клонирования искомого гена.


2. Основные виды мутаций ДНК in vitro.

Генные мутации выражаются в изменении структуры отдельных участков ДНК. По своим последствиям генные мутации делятся на две группы: мутации без сдвига рамки считывания и мутации со сдвигом рамки считывания. Мутации без рамки считывания происходят в результате замены нуклеотидных пар, при этом общая длина ДНК не изменяется.



Точковые мутации- изменение последовательности нуклеотидов в пределах одного гена. Их можно разделить на несколько типов: 1. Транзиции. При транзиции один пиримидин замещается другим пиримидином или один пурин замещается другим пурином: н-р, пара А-Т становится парой Г-Ц, или наоборот. Азотистая кислота- это мутаген, который вызывает транзиции. Она конвертирует цитозин а урацил. Цитозин обычно дает пару с гуанином, но урацил- с аденином. В результате пара Ц-Г становится парой Т-А, когда А спаривается с Т в следующей репликации. Азотистая кислота оказывает такой же эффект на аденин, превращая пару А-Т в пару Ц-Г. 2. Трансверзии. Пурин замещается пиримидином или наоборот, н-р, пара А-Т становится парой Т-А или Ц-Г. 3. Мутация сдвига рамки считывания — тип мутации в последовательности ДНК, для которого характерна вставка или делеция нуклеотидов, в количестве не кратном трем. В результате происходит сдвиг рамки считывания при транскрипции мРНК. Хромосомные мутации: 1. Инверсии- хромосомные перестройки, связанные с поворотом отдельных участков хромосомы на 180. Происходит изменение порядка расположения генов на хромосоме, при этом может быть утрата одних функций и приобретение новых. 2 Транслокации- хромосомные перестройки, в результате которых часть хромосомы переносится в друге место той же хромосомы или в другую хромосому, но общее число генов не изменяется. Внутрихромосомные танслокации возникают в результате образования трех разрывов и перенесения хромосомного сегмента в другой район той же хромосомы. Межхромосомные реципрокные транслокации возникают в результате образования двух разрывов и обмена участками негомологичных хромосом. 3.Делеции- выпадение участков хромосомы или нескольких генов. 4. Дупликации- удвоение генов; дополнительный наследственный материал, идентичный тому, который уже есть в геноме. Геномные мутации: 1. Анеуплоидия- изменение кариотипа, при котором число хромосом в клетках не кратно гаплоидному набору (n). Отсутствие в хромосомном наборе диплоидного организма одной хромосомы называется моносомией (2n-1); отсутствие двух гомологичных хромосом — нуллисомией (2n-2); наличие дополнительной хромосомы называется трисомией (2n+1). Анеуплоидия возникает в результате нарушения сегрегации хромосом в митозе или мейозе. 2. Полиплоидия- изменение числа хромосом, когда в клетке присутствует более двух гаплоидных наборов.

3.Общая схема клонирования рекомбинантных ДНК.

1. Из организма донора извлекают нужную ДНК, подвергают ее ферментативному гидролизу и извлекают нужный ген.

2. У бактерий или других клеточных структур извлекают вектор (плазмиду) и его разрезают.

3. Вставляют в вектор фрагмент ДНК.

4. Полученную конструкцию вводят в клетку хозяина, где она передается потомкам.

5. Получают специфический белковый продукт, синтезируемый клетками хозяина.





4.Роль генной инженерии в молекулярно-биологических и генетических исследованиях.

Возникновение ген-ой инженерии связано с развитием молекулярной биологии. Исследования позволили перейти от описания структуры и функции клеток на уровне органелл к установлению молекулярных механизмов протекающих в них процессов. Ученые 60-х годов считали, что репликации, транскрипции, трансляции и системы их регуляции разгаданы. Схема, показывающая однонаправленный поток ген-ой инф-ии, ДНК-РНК-белок, была названа основной догмой молекулярной биологии. Кодирование белков – важная, но не единственная функция ДНК, нужно было узнать, какова общая организация последовательностей ДНК, и каким образом отдельные гены взаимодействуют друг сдругом в геноме организма. Изучение биохим-их св-в клетки не давало надежды на установление деталей ген-ой организации. Для этого нужно было научиться "разрезать" ДНК в определенных местах. Ещё проблема – невозможность определения послед-тей нуклеотидов в ДНК. Знание ген-ого кода нельзя было применить, т.к. не было прочитано ни одного реально существенного ген-ого текста. Также нельзя было выделить ген, ни расшифровать его структуру и структуру последовательностей нуклеотидов, которые к нему примыкают и обеспечивают его экспрессию. Причина – простейшие организмы содержат очень длинные молекулы ДНК (геном кишечной палочки составляет несколько миллионов н.п.), а геном млекопитающих и человека около 3 млрд пар оснований. Но в течении последующих лет развивались хим-ие и энзимологические матоды, которые привели к созданию рекомбинантных ДНК и положат начало ген-ой инженерии Г.и. - направление исследований в молекулярной биологии и генетике, конечной целью которых является получение с помощью лабораторных приемов организмов с новыми комбинациями наследственных св-в. В основе г.и. лежит обусловленная последними достижениями молекулярной биологии и генетики возможность целенаправленного манипулирования с фрагментами нуклеиновых кислот. К этим достижениям отнесят установление универсальности генетического кода, то есть факта, что у всех живых организмов включение одних и тех же а/к в белковую молекулу кодируются одними и теми же последовательностями нуклеотидов в цепи ДНК; успехи генетической энзимологии, предоставившей в распоряжение исследователя набор ферментов, позволяющих получить в изолированном виде отдельные гены или фрагменты нуклеиновой кислоты, осуществлять in vitro синтез фрагментов нуклеиновых кислот, объединить в единое целое полученные фрагменты. Т.о., изменение наследственных св-в организма с помощью г.и. сводится к конструированию из различных фрагментов нового генетического материала, введение этого материала в рецепиентный организм, создания условий для его функционирования и стабильного наследования.



5. Различные способы получения замен нуклеотидов (дезаминорование цитозина, включение аналогов нуклеотидов и др.)

Аналоги оснований по молекулярной структуре очень похожи на основания, нормально входящие в цепи ДНК. Эти соединения приводят к мутациям потому, что они могут существовать в альтернативных (таутамерных) состояниях. В каждом из двух состояний аналоги спариваются с разными нормальными основаниями, в результате чего может произойти их замена. Например, 5-бромурацил в нормальном состоянии спаривается с аденином, в более редком таутамерном состоянии- с гуанином. В связи с этим 5-бромурацил индуцирует транзицию, когда включается в ДНК в одном состоянии, затем в следующем раунде репликации ДНК превращается в более редкую таутамерную форму. Другим широко известным аналогом оснований является 2-аминопурин. Ряд химических агентов действуют как мутагены, непосредственно модифицируя химическую структуру и свойства оснований. К ним относятся дезаминирущие, гидроксилирующие и алкилирующие агенты. Азотистая кислота (HNO2) осуществляет окислительное дезаминирование, т.е. удаляет аминогруппы (-NH2) из таких оснований, как гуанин, цитозин и аденин. В результате дезаминирования гуанина азотистой кислотой образуется ксантин, но, так как это пуриновое основание имеет тот же тип спаривания, мутация не проявляется. Однако когда модифицируется цитозин, получается урацил (который спаривается с аденином). В итоге происходит транзиция от C-G К Т-А в ходе акта репликации. Аналогичным образом азотистая кислота модифицирует аденин в гипоксантин- основание, спаривающееся с цитозином, а не с тимином, что продуцирует транзицию А-Т в G-C. Другим мутагеном, модифицирующим основания, является гидроксиламин (NH2OH), который специфически реагирует с цитозином, добавляя гидроксильную группу (-OH), в результате чего он спаривается уже с аденином, а не с гуанином. Таким образом, обработка гидроксиламином индуцирует транзиции C-G в Т-А. Метилметансульфонат алкилирует гуанин, т.е. добавляет группы –CH3 или –CH2CH3 к кислороду в 6-й позиции, в результате чего образуется О6-алкилгуанин или О6-мтилгуанин. Метилированный гуанин будет спариваться с тимином, а не с цитозином, давая транзицию G-C в А-Т.



image035

6. Роль генной инженерии в медицине, сельском хозяйстве и промышленности.

Промышленная микробиология - развитая отрасль промышленности, во многом определяющая сегодняшнее лицо биотехнологии. И производство практически любого препарата, сырья или вещества в этой отрасли сейчас так или иначе связано с генетической инженерией. Дело в том, что генетическая инженерия позволяет создавать микроорганизмы - сверхпродуценты того или иного продукта. Имея микроорганизм сверхпродуцент, можно получить больше продукции на том же оборудовании без расширения производства, без дополнительных капитальных вложений. К тому же микроорганизмы растут в тысячу раз быстрее, чем растения или животные. Н-р, с помощью генетической инженерии можно получить микроорганизм, синтезирующий витамин В2 (рибофлавин), используемый в качестве кормовой добавки в рационах животных. Его производство данным способом эквивалентно строительству 4-5 новых заводов по получению препарата обычным химическим синтезом. Особо широкие возможности появляются у генетической инженерии при производстве ферментов-белков - прямых продуктов работы гена. Увеличить производство фермента клеткой можно, либо введя в нее несколько генов этого фермента, либо улучшив их работу путем установки перед ними более сильного промотора. Так, продукция фермента в-амилазы в клетке была увеличена в 200 раз, а лигазы - в 500 раз. С генетической инженерией связаны надежды на расширение ассортимента микробиологических удобрений и средств защиты растений, увеличение производства метана из бытовых и сельскохозяйственных отходов. Путем выведения микроорганизмов, более эффективно разлагающих различные вредные вещества в воде и почве, можно существенно повысить эффективность борьбы с загрязнением окружающей среды. Большие надежды возлагаются на генетическую инженерию растений. Только с ее помощью можно радикальным образом расширить границы изменчивости растения в сторону каких-либо полезных свойств, передав ему гены от других (возможно, неродственных) растений и даже гены животного или бактерии. С помощью генетической инженерии можно определять присутствие вирусов в сельскохозяйственных растениях, предсказывать урожайность, получать растения, способные противостоять различным неблагоприятным факторам внешней среды. Сюда относят устойчивость к гербицидам (средствам борьбы против сорняков), инсектицидам (средствам борьбы против насекомых-вредителей), устойчивость растений к засухе, к засолению почв, фиксации растениями атмосферного азота и т. п. В довольно длинном перечне свойств, которыми люди хотели бы наделить сельскохозяйственные культуры, не последнее место занимает устойчивость к веществам, применяемым против сорняков и вредных насекомых. Благодаря генетической инженерии неожиданно переплетаются интересы животноводства и медицины. В случае пересадки корове гена интерферона (лекарственного препарата, очень эффективного в борьбе с гриппом и рядом других заболеваний), из 1 мл сыворотки можно выделить 10 млн. ед. интерферона. Аналогичным способом можно получить целый ряд биологически активных соединений. С помощью генетической инженерии можно осуществлять и мутационный биосинтез антибиотиков. Суть его сводится к тому, что в результате целенаправленных изменений в гене антибиотика получается не законченный продукт, а некий полуфабрикат. Подставляя к нему те или иные физиологически активные компоненты, можно получить целый набор новых антибиотиков. Уже производятся, проходят клинические испытания или активно разрабатываются следующие препараты: инсулин, гормон роста, интерферон, фактор VIII, целый ряд противовирусных вакцин, ферменты для борьбы с тромбами (урокиназа и тканевой активатор плазминогена), белки крови и иммунной системы организма. Изучаются молекулярно-генетические механизмы возникновения раковых заболеваний. Кроме того, разрабатываются методы диагностики наследственных заболеваний и пути их лечения, так называемая генотерапия.

7. Мутагенез ДНК in vitro с помощью олигонуклеотидов заданной последовательности. Химический синтез олигонуклеотидов.

В 1978-1979 гг. С. Джиллам и М. Смит с соавторами экспериментально обосновали возможность использования синтетических олигонуклеотидов в качестве мутагенов. Объектом мутагенеза авторы выбрали фаг 0X174, имеющий небольшую одноцепочечную



кольцевую ДНК, для которой уже была известна последовательность нуклеотидов. Одноцепочечную кольцевую ДНК гибридизовали с синтетическим олигонуклеотидом, имевшим определенные отличия от соответствующей последовательности фагового генома, например точечную замену одного из нуклеотидов. Данный олигонуклеотид использовали в качестве праймера для достройки второй цепи на ДНК-матрице. Эту реакцию осуществляли с помощью фрагмента Кленова ДНК-полимеразы I Е. coli и ДНК-лигазы. Затем препарат ДНК обрабатывали Нуклеазой S1 для гидролиза частично двухцепочечных молекул фаговой ДНК и трансфицировали им сферопласты Е. coli. В процессе репликации образовывалось смешанное фаговое потомство, состоявшее как из фагов дикого типа, так и из мутантных. Причем мутантная форма составляла около 15 % полученного потомства, хотя теоретически может достигать 50 %. Для увеличения выхода мутантов С. Джиллам и М. Смит использовали оригинальный метод селекции in vitro. Они подобрали условия, при которых синтетический олигонуклеотид-мутаген, имеющий точечную замену в последовательности дикого типа, мог гибридизоваться только с мутантной формой фаговой ДНК, но не с ДНК дикого типа. После полимеразной реакции и обработки Нуклеазой S1 происходило обогащение препарата ДНК мутантными формами. Двух циклов описанной процедуры было достаточно, чтобы выход мутантов повысить практически до 100 %. Анализ условий, необходимых для эффективного связывания с ДНК-матрицей олигонуклеотида, содержащего единичную нуклеотидную замену, и дальнейшего праймирования полимеразной реакции, показал, что в этом случае достаточно двух или трех комплементарных нуклеотидов на З'-конце и шести или семи — на 5'-конце от некомплементарного нуклеотида. Когда вводятся большие изменения, размер олигонуклеотида должен быть увеличен. Разработанный на модельной системе фага 0X174 метод олигонуклеотид-направленного мутагенеза получил дальнейшее развитие на других типах молекул ДНК, прежде всего на ДНК нитевидных фагов и плазмидах. Химический синтез олигонуклеотидов. Первый нуклеотид последовательности через его 5'-фосфатную группу химически закрепляют на твердой подложке, н-р, полистирола. Все потенциально химически активные группы и атомы его нуклеинового основания (аминогруппы, кислород) временно блокируются присоединением инертной «защиты». 3'-ОН группа сахара не блокируется. Все нуклеотиды, подлежащие последовательному присоединению тоже заблаговременно защищаются не только по нуклеиновым основаниям, но и по 3'-ОН группе рибозы или дезоксирибозы. Активность фосфорной кислоты, присоединенной по 5'-положению сахара умеряется «навеской» хлорбензола по одному из ее кислородов. Таким образом, для реакции остается свободной только ОН-группа этой кислоты. Теперь в реакционную среду вносят второй по заданному порядку нуклеотид. В реакции между двумя ОН-группами отщепляется вода и устанавливается ковалентная фосфодиэфирная связь двух нуклеотидов. Затем снимается химическая защита с 3'-ОН группы только что присоединившегося второго нуклеотида и в реакционную среду вносят третий защищенный нуклеотид. И так далее. Разумеется, отщепление воды и образование фосфодиэфирной связи происходит не само собой, а в присутствии сложного химического катализатора реакции. По окончании синтеза заданной цепочки олигонуклеотида все защиты снимаются и олигонуклеотид отделяется от твердой подложки.

8.Характеристика репрессоров как элементов, контролирующих синтез индуцибельных ферментов.

Репрессор — регуляторный белок, подавляющий транскрипцию генов регулируемого им оперона в результате связывания с оператором.Репрессоры синтезируется под контролем гена-регулятора в кол-ве от 10 до 20 молекул на клетку в виде активной, т. е. способной непосредственно связываться с оператором, или неактивной форм.

Образование активного репрессора характерно для индуцибельных ферментов, синтез к-рых начинается только при попадании в клетку специфических низкомолекулярных веществ — индукторов. Связывание индуктора с репрессором инактивирует репрессор и тем самым открывает синтез соответствующего ферментов (индукция). Для репрессибельных ферментов характерно образование неактивного репессора , активация которого происходит при попадании в клетку низкомолекулярных веществ — корепрессоров. При этом синтез ферментов, кодируемых опероном, прекращается (репрессия). Обычно индукторы и корепрессоры обозначают общим термином — эффекторы.

Классическим примером репрессора служит LacI, подавляющий экспрессию лактозного оперона у кишечной палочки.

Транскрипция генов lacZYA контролируются белкос-репрессором, кодируемым геном lac I. Гены lacZYA контролируются негативно: они транскрибируются до тех пор, пока не выключаются белком-регулятором.

lacZ кодирует фермент β-галактозидазу, которая расщепляет дисахарид лактозу на глюкозу и галактозу.

lacY кодирует β-галактозид пермеазу, мембранный транспортный белок, который переносит лактозу внутрь клетки.

lacA кодирует β-галактозид трансацетилазу, фермент, переносящий ацетильную группу от ацетил-КoA на - β -галактозиды.

Мутаций гена-регулятора обуславливает постоянную транскрипционную активность генов lacZYA. Белок

Белок репрессор lac-репрессор связывается с оператором на старет транскрипций кластера lacZYA. Когда репрессор связывается с оператором,он предотвращает движение РНК-полимеразы и инициацию транскрипций.

Белок-репрессор имеет два сайта связывания: один для индуктора,другой для оператора. Когда индуктор связывается со своим сайтом, это изменяет конформацию молекулы белка, что изменяется связывающая способность другого сайта. Индуктор лактоза поступает в клетки, связывается с репрессором, в результате чего репрессор становится неспособным сдерживать транскрипцию и она начинается. При удалений индуктора репрессор вновь занимает положение на операторе,останавливая транскрипцию.





9.Оперонная организация бактериальных генов. Модель Ф. Жакоба и Ж. Моно на примере лактозного (lac) оперона.

Оперон — функциональная единица генома у прокариот.

Модель оперона прокариот была предложена Ф.Жакобом и Ж.Моно в 1961 г. для объяснения регуляции генов у E.coli, за что в 1965 году получили Нобелевскую премию.

Опероны по количеству цистронов делят на моно-, олиго- и полицистронные, содержащие, соответственно, только один, несколько или много цистронов (генов).

Лактозный оперон (lac оперон) — полицистронный оперон бактерий, кодирующий гены метаболизма лактозы.

Лактозный оперон состоит из трех структурных генов – lacZ, lacY и lacA, продукты которых необходимы для использования лактозы в качестве источника углерода, промотора, с которым связывается РНК-полимераза, операторного участка (оператора), с которым связывается белок-репрессор – продукт гена lacI, Терминатор – это последовательность ДНК, которая распознается РНК- полмеразой как сигнал к прекращению транскрипции.



lacZ кодирует фермент β-галактозидазу, которая расщепляет дисахарид лактозу на глюкозу и галактозу.

lacY кодирует β-галактозид пермеазу, переносит лактозу внутрь клетки.

lacA кодирует β-галактозид трансацетилазу.

Существует негативная также позитивная регуляция транскрипций у прокариот.





Поделитесь с Вашими друзьями:
  1   2   3   4


База данных защищена авторским правом ©vossta.ru 2019
обратиться к администрации

    Главная страница